CONTROL Y OBSERVACIÓN DE LA FECUNDACIÓN

OBJETIVOS:

• Realizar la fecundación de esta especie marina
• Identificar gametos y observar lo que ocurre en la fecundación

MATERIALES:

• Especímenes de erizo de mar.  
• KCl 0.5 molar
• Agua destilada
• Agua de mar
• 4 Vasos de precipitados de 200 ml.
• Jeringuillas estériles
• 3 cubreobjetos
• 3 portaobjetos
• Lanceta
• Microscopio
• Cámara fotos

METODOLOGÍA:

Obtener  especímenes de Erizos de Mar.

Mantener vivos los erizos de mar antes de la práctica. Debido a la dificultad de la tarea, intentaremos realizar la práctica lo más rápido posible para mantener con vida los erizos.  Hemos elegido el “estímulo químico”, que consiste en aplicar una solución de KCl (cloruro de potasio) al 0,5 M. Con éste método el erizo evacua sus gametos y no muere.

Extracción de los gametos:  Tomamos el erizo, lo invertimos (con la zona oral hacia arriba, linterna de Aristóteles) y le inyectamos  2 ml de solución KCl 0,5M con una jeringa. Luego se mueve suavemente el erizo para mezclar la  solución de KCl dentro de él. En esta etapa como no sabemos el sexo del erizo se debe esperar la salida de los gametos, para ello los posamos cada uno en una vaso de precipitados lleno de agua de mar. La coloración de los ovocitos es roja y de los espermatozoides blanca. La eyaculación de los gametos se realizará por la parte aboral o anal. Esperamos a que los erizos eyaculen todos los gametos.

Observación de los gametos:  Es preciso decir que para observar los espermatozoides hay que diluirlos, ya que es tan alta la concentración que al no realizar una dilución sería imposible su observación.  Tomamos con una lanceta un poco del líquido blanquecino liberado por el erizo macho y depositamos una pequeña gota en un portaobjeto diluida, le colocamos un cubreobjetos y lo observamos al microscopio. Repetimos esta operación con el líquido rojizo de la hembra y hacemos fotografías. 

Fecundación:  En la mayoría los organismos marinos la fecundación es “externa”, es decir, los gametos son liberados al ambiente y la unión de estas células se realiza en el mar.  Extraemos muestras de óvulos (líquido rojo) y los depositamos en un vaso pp. Agregamos 150 ml de agua de mar. Luego extraemos una muestra de espermatozoides y la depositamos en el vaso pp. de los óvulos. Agitamos el vaso suavemente, esperamos un minuto y sacamos una gota de la solución para observarla al microscopio.

Fases del desarrollo embrionario:  Dejamos el vaso de precipitados con los huevos fecundados en un lugar seguro, a oscuras y a temperatura ambiente, y en los tiempos indicados a continuación, extraemos una muestra del vaso y depositarla en un portaobjetos, para luego observarla al microscopio. En las primeras horas ya observamos divisiones celulares y a los 4 días podemos diferenciar la larva del erizo de mar.

FOTOS DE LA FERIA:

VÍDEO DE LA FERIA: